離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應(yīng)用

離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中展現(xiàn)出顯著的技術(shù)優(yōu)勢(shì)，成為分子生物學(xué)研究的關(guān)鍵工具。該設(shè)備通過真空負(fù)壓（50-100 mbar）降低溶劑沸點(diǎn)，配合溫和加熱（30-40℃）和離心力（1000-1500 rpm）三重作用，可在30-60分鐘內(nèi)高效濃縮微量核酸樣品（50μL→5μL），同時(shí)保持DNA/RNA完整性（回收率≥95%）。其封閉式設(shè)計(jì)有效防止氣溶膠污染，支持96孔板高通量操作，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)乙醇沉淀法（節(jié)省60%時(shí)間且避免鹽分殘留）。典型應(yīng)用于NGS文庫(kù)構(gòu)建、PCR產(chǎn)物純化等場(chǎng)景，尤其適合珍貴樣本處理，如單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序中的cDNA濃縮。部分機(jī)型還集成冷凝捕集功能，實(shí)現(xiàn)有機(jī)溶劑安全回收，滿足GLP實(shí)驗(yàn)室規(guī)范要求。

離心濃縮儀憑借其溫和高效的特性，已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中核酸（DNA/RNA）濃縮純化的關(guān)鍵設(shè)備，其應(yīng)用優(yōu)勢(shì)及技術(shù)要點(diǎn)如下：

1、活性保護(hù)

• 低溫（30-40℃）真空濃縮，避免核酸高溫變性（如DNA斷裂或RNA降解）；

• 對(duì)比傳統(tǒng)乙醇沉淀法，回收率提升20%以上（文獻(xiàn)數(shù)據(jù)）；

2、高通量處理

• 單次可并行處理48-180個(gè)微量樣本（適配1.5mL離心管）；

• 自動(dòng)化程序?qū)崿F(xiàn)無(wú)人值守，節(jié)省60%操作時(shí)間；

3、兼容性廣

• 適用于各類提取緩沖液（TE buffer、Tris-HCl等）及有機(jī)溶劑（異丙醇、乙醇）；

• 可濃縮pg級(jí)至μg級(jí)核酸，滿足NGS、PCR等下游實(shí)驗(yàn)需求；

以DNA濃縮為例，離心濃縮儀操作主要步驟如下：

一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1、設(shè)備與耗材

○離心濃縮儀（預(yù)冷至4℃）

○1.5/2.0 mL耐有機(jī)溶劑離心管（推薦RNase/DNase-free）

○真空泵油（確保液位達(dá)標(biāo)）

○冷阱

2、樣品預(yù)處理

○檢測(cè)DNA初始濃度（Nanodrop A260/A280應(yīng)為1.8-2.0）

○若含高鹽（如NaCl＞200 mM），用TE buffer稀釋10倍

二、分裝與裝載

1、分裝樣品

將DNA溶液（≤1.5 mL/管）對(duì)稱裝入離心轉(zhuǎn)子，平衡誤1差＜0.1 g。

2、參數(shù)設(shè)置

三、濃縮過程監(jiān)控

1、實(shí)時(shí)觀察

通過觀察窗確認(rèn)無(wú)液體飛濺（若發(fā)生，立即暫停并檢查平衡），冷凝管結(jié)霜量＞50%需暫停除霜。

2、終點(diǎn)判斷

自動(dòng)模式：儀器檢測(cè)到真空度穩(wěn)定（ΔP＜5 mbar/5min）

手動(dòng)模式：目測(cè)管底出現(xiàn)1-2 μL液滴

四、終止與回收

1、停機(jī)步驟

先關(guān)閉加熱模塊，再緩慢泄真空（速率≤10 mbar/s），最后停止離心。

2、樣品處理

立即用20 μL TE buffer重懸DNA（輕柔吹吸10次），短暫離心（1000g×30s）收集管壁殘留。

五、質(zhì)量控制

1、濃度檢測(cè)

Qubit定量（比Nanodrop更準(zhǔn)確）

瓊脂糖凝膠電泳（驗(yàn)證無(wú)降解）

2、設(shè)備維護(hù)

用10%乙醇擦拭轉(zhuǎn)子及腔體

真空泵油變色（＞200小時(shí)）需更換

富睿捷真空離心濃縮設(shè)備可同時(shí)處理多個(gè)樣品，無(wú)需擔(dān)心交叉污染。系統(tǒng)內(nèi)程序可設(shè)定至多30個(gè)，主機(jī)配備樣品在線成像系統(tǒng)，可在運(yùn)行過程中觀察樣品濃縮狀態(tài)，并根據(jù)不同的樣品對(duì)整機(jī)的真空度進(jìn)行調(diào)節(jié)。設(shè)備采用皮拉尼真空計(jì)可實(shí)時(shí)顯示腔體內(nèi)的真空度，并保證真空度的真實(shí)性。根據(jù)不同的樣品可對(duì)整機(jī)轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)節(jié)。